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細胞消化過程

更新時間:2024-05-10      點擊次數(shù):536

 細胞消化過程

不一定要一次把所有細胞都要消化下來!


晃動培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察,只要70~80%細胞都收縮了或超過適合消化時間,就該終止消化反應,如果細胞量夠即可進行后續(xù)傳代或?qū)嶒灢襟E;如果細胞量不夠,

則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細胞,再進行一次消化反應。


▲ 消化不下來的細胞(黃)請視情況決定是否再消化一次。


不一定要吹打成單細胞懸液!


一般細胞脫離培養(yǎng)底物、并經(jīng)過5~10次輕柔吹打后,會在細胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細胞),所以不需要過度延長消化時間想讓細胞


分離成單細胞懸液。


消化效果不佳,先提升消化液濃度、再加長作用時間!


當你選定了一種消化方式 (物理機械法除外),發(fā)現(xiàn)效果不佳,首先應考慮提高EDTA或胰酶濃度,效果再不佳才加長消化的作用時間,避免細胞長時間浸泡在消化液中造成的細胞膜損傷。


(一般消化液使用:0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘;0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分鐘)

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結(jié)語


細胞消化 ,是一個看似很簡單,但是有很多技術(shù)含量的步驟。消化好壞、是否污染、有無受傷,都在這短短的五六分鐘里決定。


當我們已經(jīng)可以順利操作細胞培養(yǎng)實驗,接下來要思考的,就是如何讓細胞長得更健康、更均一、做出來的實驗才會更wan美。


祝各位的細胞都顆顆透亮、粒粒分明、活力旺盛!


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