預(yù)染發(fā)光Western Marker試劑是專(zhuān)門(mén)為Western Blot 試驗(yàn)設(shè)計(jì)的分子量標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)的Western Blot 試驗(yàn)需要使用預(yù)染蛋白Marker來(lái)跟蹤檢測(cè)陽(yáng)性抗原信號(hào)和轉(zhuǎn)膜效率。 但預(yù)染蛋白Marker無(wú)法在膠片上曝光，曝光信號(hào)需要根據(jù)膜上的預(yù)染蛋白Marker來(lái)判斷，HaiGene自主研發(fā)的第二代預(yù)染發(fā)光Western marker綜合了預(yù)染marker和發(fā)光marker的優(yōu)勢(shì)，既能通過(guò)預(yù)染marker檢測(cè)轉(zhuǎn)膜效率，又能在膠片上與目的蛋白同時(shí)曝光，這樣就使得目的蛋白的判斷更加方便而準(zhǔn)確。

本公司的預(yù)染發(fā)光Western Marker由9種發(fā)光蛋白和9種預(yù)染蛋白組成，其中9種發(fā)光蛋白分別為23、30、36、44、50、62、90、120和160KDa，它們均可與抗體結(jié)合, 因此能與抗原在同一張膠片上曝出信號(hào)，陽(yáng)性信號(hào)可以直接通過(guò)Western Marker的位置來(lái)判斷；9種預(yù)染蛋白分別為15、25、35、40、40、55、70、100、130和180KDa，其中70KDa為紅色，其他為藍(lán)色，用于SDS-PAGE膠電泳時(shí)控制蛋白的電泳分離率和監(jiān)測(cè)蛋白轉(zhuǎn)膜效率。該預(yù)染發(fā)光Western marker可適用于熒光檢測(cè)和化學(xué)發(fā)光法Western Blot檢測(cè)。

主要特征

可與抗原同時(shí)檢測(cè)信號(hào)，使Western blot結(jié)果判斷更加簡(jiǎn)便

發(fā)光marker沒(méi)有偶聯(lián)和標(biāo)記其他分子，分子量更加準(zhǔn)確

綜合發(fā)光marker和預(yù)染marker的優(yōu)勢(shì)，既能監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)膜又能與抗原同時(shí)檢測(cè)

方便、即用型——無(wú)需混合、還原和加熱

適用于熒光和化學(xué)發(fā)光等Western blot檢測(cè)

儲(chǔ)存

-20°C保存，有效期2年。

預(yù)染發(fā)光Western Marker試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后，陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類(lèi)型限制，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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